التحاليل الطبية

تحليل PCR

تحليل-PCR

ما هو تحليل PCR؟

تحليل PCR بالإنجليزية Polymerase chain reaction)) يشير هذا التفاعل إلى “تفاعل سلسلة البلمرة”.

وهي تقنية حديثة تسمح للأطباء بإنشاء ملايين النسخ المتماثلة للحمض النووي من عينة واحدة. وفي الواقع تحليل  PCR يسمح لعلماء الطب الشرعي بإجراء تحليل الحمض النووي على عينات صغيرة مثل خلايا الجلد،

على عكس بعض تقنيات تحليل الوراثة الأخرى، كما يتمتع تحليل PCR بميزة تحليل أحجام العينات الصغيرة

للغاية بالإضافة إلى تشخيص البصمات والأمراض الوراثية، وقد قام باكتشافه

أحد موظفي شركة سيتوس وكان يدعى كاري موليس في عام 1983 .

 

استخدام وتطبيق تحليل PCR

تم تطوير تحليل PCR في أوائل الثمانينيات وأصبح تقنية مفيدة للغاية ومدعومة على نطاق واسع لتحليل الحمض النووي.

كما أنها تنقية لديها العديد من التطبيقات مثل اختبار الأبوة والتحقيقات الجنائية،

علاوة على ذلك يمكن استخدامه للكشف عن أنواع السرطان مثل سرطان الدم والأورام اللمفاوية،

في الواقع ، PCR حساس بشكل خاص للكشف عن الخلايا الخبيثة أكثر بكثير من التقنيات الأخرى المستخدمة في الوقت الحالي.

أيضاً تحليل PCR له تطبيقات للكشف عن الالتهابات التي تنطوي على البكتيريا أو الفيروسات.

يمكن أيضًا اكتشاف الطفرات من خلال هذه الطريقة لتحليل الحمض النووي،

مما يعني أن تحليل PCR يمكن أن يكتشف العيوب، وبالتالي يكون مهمًا لاختبار الأمراض الوراثية.

 

شروط تطبيق PCR

  • العينة: وهي تكون عبارة عن الحمض النووي الذي يُراد فحصه مثل الجلد، الشعر، الدم.
  • أحد أنزيمات البلمرة التي يتم استخراجها من داخل أنواع البكتريا المختلفة والتي تتكاثر في الجو الساخن حيث درجات الحرارة العالية والتي يطلق عليها اسم Thermus) Aquatic).

 

الكشف عن منتجات PCR

  • يتم استخدام مدقق معيّن خاص بتسلسل الجينات المستهدفة للكشف عن منتج الجين المضخّم PCR (المعروف أيضًا باسم (Amplicon). بناءً على طبيعة جزيء المراسل المستخدم، يولِّد المدقق إشارات إشعاعية أو لونية أو فلوروميترية أو كيميائية. التحقيق القائم على التدقيق من Amplicons يخدم غرضين
  • يتيح التصور للمنتج PCR
  • ويوفر خصوصية من خلال ضمان أن Amplicon هو التسلسل المستهدف من الاهتمام وليس نتيجة التضخيم غير محددة.
  • بصرف النظر عن طريقة التهجين القائمة على الحمض النووي، فإن طريقة الرحلان الكهربائي البسيطة في بعض الأحيان تكون كافية لتأكيد وجود Amplicon معين.

 

أنواع تقنية البي سي آر (PCR)

  • تم تطوير العديد من طرق تعديل PCR لتعزيز فائدة هذه الطريقة في التشخيص بناءً على تطبيقاتها، وهنالك بعض الأنواع الشائعة من PCR هي
  • . RT-PCR (أو عكس النسخ PCR). يتم استخدامه لعكس النسخ وتضخيم الحمض النوويRNA إلىDNa.
  • PCR المتداخل: يتم استخدامه لزيادة خصوصية تضخيم الحمض النووي، ويتم استخدام مجموعتين من الاشعال في تفاعلين متعاقبين. ففي PCR الأول يتم استخدام زوج واحد من الإشعال لتوليد منتجات الحمض النووي، والتي قد تحتوي على منتجات تضخيمها من المناطق غير المستهدفة. ثم يتم استخدام المنتجات من    PCR الأول كقالب في PCR ثانية، باستخدام واحد (‘hemi-nesting’) أو اثنين من الاشعال المختلفة التي توجد مواقع الربط الخاصة بها (متداخلة) ضمن المجموعة الأولى، وبالتالي زيادة الخصوصية.
  • PCR الكمي: يتم استخدامه لقياس كمية محددة من الحمض النووي المستهدف (أو الحمض النوويRNA ) في عينة.
  • PCR الساخنة: إنها تقنية يتم تنفيذها يدويًا عن طريق تسخين مكونات التفاعل إلى درجة حرارة انصهار الحمض النووي (على سبيل المثال 95 درجة مئوية) قبل إضافة البلمرة.
  • PCR التجميع: (المعروف أيضًا باسم Polymerase Cycling Assembly أو PCA). هو تخليق هياكل الحمض النووي الطويل عن طريق إجراء PCR على مجموعة من قليل النكليوتيدات الطويلة مع شرائح قصيرة متداخلة، لتجميع قطعتين أو أكثر من الحمض النووي في قطعة واحدة.
  • PCR مستعمر: هذا الأسلوب يتم فيه فحص المستعمرات البكتيرية مباشرة عن طريق PCR .
  • تفاعل البلمرة المتسلسل الرقمي: هذه التقنية يتم فيها تضخيم الآلاف من العينات في وقت واح ، كل في قطرة منفصلة داخل مستحلب.
  • COLD-PCR (التضخيم المشترك في انخفاض درجة حرارة التغير- PCR) هو بروتوكول معدل يثري الأليات المتغيرة من مزيج من النمط البري والحمض النووي المحتوي على طفرة.

 

 
السابق
علاج تشققات الجسم
التالي
المغنيسيوم وأعراض سن اليأس

اترك تعليقاً